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张恺莉,刘晓妹.芒果炭疽病菌内切葡聚糖酶基因CgEg1B的克隆与敲除载体构建[J].中国南方果树,2017,46(1):
芒果炭疽病菌内切葡聚糖酶基因CgEg1B的克隆与敲除载体构建
Clone and Construction of Disruption Vector of Gene CgEg1B from Colletotrichum gloeosporioides on Mango
投稿时间:2016-04-09  修订日期:2016-04-18
DOI:
中文关键词:  芒果  胶孢炭疽菌  内切葡聚糖酶CgEg1B基因  克隆  敲除载体
英文关键词:mango  Colletotrichum gloeosporioides  endoglucanase gene CgEg1B  cloning  disruption vector
基金项目:国家自然科学基金项目(面上项目,重点项目,重大项目)
作者单位E-mail
张恺莉 海南大学环境与植物保护学院 1437643342@qq.com 
刘晓妹* 海南大学环境与植物保护学院 lxmpll@126.com 
摘要点击次数: 2391
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中文摘要:
      芒果炭疽病(Colletotrichum gloeosporioides)是为害芒果的重要病害之一,为了明确内切葡聚糖酶CgEg1B与芒果炭疽病菌致病力的关系,本实验以芒果炭疽病菌DNA为模板,利用同源克隆技术扩增CgEg1B,对其序列特征、蛋白的保守结构域进行分析,并借助In-Fusion?HD Cloning Kit技术进行敲除载体构建。结果表明,该基因DNA和cDNA全长分别为1077 bp、1020bp,编码区有1个内含子(大小为57bp),推测编码339个氨基酸,其分子量约为37.13 kDa,等电点PI为5.11。与NCBI网站中已公布的基因进行Blastp比对,发现该序列与鳄梨炭疽菌(C.gloeosporioides)(EQB54542.1)的内切葡聚糖酶基因相似性均为99%;该基因的敲除载体pCgEg1BGH-1构建成功。CgEg1B基因具备真菌内切葡聚糖酶基因家族的序列特征,推测CgEg1B基因可能与芒果炭疽病菌的侵入、定植和致病性有关。
英文摘要:
      
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