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宗泽冉,张彩霞,丛佩华,田义,张利义,韩晓蕾.苹果Mal d 1基因的原核表达及纯化[J].中国南方果树,2017,46(5):
苹果Mal d 1基因的原核表达及纯化
Prokaryotic expression and purification of Mald1 gene in apple
投稿时间:2017-01-19  修订日期:2017-03-29
DOI:
中文关键词:  苹果  斑点落叶病  原核表达  纯化
英文关键词:
基金项目:
作者单位E-mail
宗泽冉 中国农业科学院果树研究所 736439537@qq.com 
张彩霞 中国农业科学院果树研究所 cxzhang-bj@163.com 
丛佩华* 中国农业科学院果树研究所 congph@163.com 
田义 中国农业科学院果树研究所 736439537@qq.com 
张利义 中国农业科学院果树研究所 736439537@qq.com 
韩晓蕾 中国农业科学院果树研究所 736439537@qq.com 
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中文摘要:
      以“王林”苹果为试材,采用RT-PCR的方法克隆获得Mal d 1基因,并将该基因连接到原核表达载体pCold Ⅱ上,经测序确定所构建的重组载体pCold-Mal d 1开放阅读框正确。将获得的重组质粒pCold-Mal d 1转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经0.1 mmol?L-1IPTG,15 癈,24 h冷诱导表达,SDS-PAGE电泳检测,证明Mal d 1蛋白获得了稳定而高效的表达,所表达蛋白是大小约为22.4 kD的融合蛋白。经镍柱纯化后获得相对单一的蛋白,可用于免疫组织化学,蛋白印记检测等。
英文摘要:
      
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