唐莹莹,杨祥燕,蔡元保,曾黎明,郑文武,李穆,林玉虹,叶维雁.澳洲坚果RAPD标记反应体系的建立及应用[J].中国南方果树,2018,47(3): |
澳洲坚果RAPD标记反应体系的建立及应用 |
Establishment and Application of RAPD Reaction System for Macadamia |
投稿时间:2017-12-15 修订日期:2017-12-29 |
DOI: |
中文关键词: 澳洲坚果 RAPD 单因素试验 体系优化 |
英文关键词:Macadamia RAPD Single factor experiment System optimization |
基金项目:广西自然科学基金项目(2016GXNSFBA380005);广西创新驱动发展专项(桂科AA17204058);广西直属公益性科研院所基本科研业务费专项(桂热研201606;桂热研201710);南宁市科学研究与技术开发计划项目(20172154-1)资助 |
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中文摘要: |
以澳洲坚果为试材,利用单因素试验对影响RAPD标记反应体系的主要因素进行优化,建立适合澳洲坚果RAPD标记的反应体系。结果表明,澳洲坚果RAPD最优反应体系为:20 μL反应体系中,含40 mg L-1模板DNA,0.6 μmol L-1引物,1.0 U Taq聚合酶,2.5 mmol L-1 Mg2+和0.4 mmol L-1 dNTPs。利用该最优反应体系对不同引物和澳洲坚果种质进行验证,扩增条带具有良好的可靠性和稳定性,且分辨率较高。因此,该RAPD-PCR反应体系可用于澳洲坚果种质资源鉴定及遗传多样性分析等研究。 |
英文摘要: |
Main factors of PCR reaction system were optimized by single factor design to build the suitable reaction system of macadamia (Macadamia spp.) RAPD marker. The results showed that final volume of optimum reaction system was 20 μL, including 40 mg L-1 template DNA, 0.6 μmol L-1 primer, 1.0 U Taq polymerase, 2.5 mmol L-1 Mg2+ and 0.4 mmol L-1 dNTPs. The optimum RAPD reaction system was tested with macadamia germplasm by different RAPD primers, obtaining the reliable, steady and high resolution bands. It showed that the optimum RAPD-PCR reaction system could be applied in the identification and genetic diversity analysis of germplasm resources on macadamia. |
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