顾林平,张冰,费艳,王化坤,王鹏凯.枇杷iPBS分子标记的PCR体系优化与引物筛选[J].中国南方果树,2019,48(1): |
枇杷iPBS分子标记的PCR体系优化与引物筛选 |
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投稿时间:2018-04-11 修订日期:2018-06-13 |
DOI: |
中文关键词: 枇杷 iPBS分子标记 体系优化 引物筛选 |
英文关键词: |
基金项目:江苏省农业科技自主创新资金[CX(17)2016];苏州市科技计划项目(SNG201632) |
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中文摘要: |
枇杷的DNA为模板进行iPBS-PCR扩增,采用预实验中效果较好的iPBS分子标记引物2241,对枇杷iPBS-PCR反应体系中的dNTP、Mg2+、引物、模板用量进行优化,根据检测结果确定枇杷iPBS-PCR使用:10×Taq buffer 2μL,25mM Mg2+ 1.6μL,2.5mM dNTP 1.6μL,10μmol/L Primer 1μL,5U/μL Taq酶0.2μL,模板DNA 5ng 的20μL反应体系。反应程序中的退火温度可以参考iPBS引物理论Tm值。对33条iPBS引物扩增测试的结果显示在该反应体系下可以筛选到22谱带清晰、多态性好的引物,可用于枇杷的分子标记分析。 |
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