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龚 宏,易善萍,聂显双,刘 政,李谢雨,杨立,程寅胜,张义,伍 涛.梨酵母双杂交cDNA文库的构建与鉴定[J].中国南方果树,2023,52(3):
梨酵母双杂交cDNA文库的构建与鉴定
投稿时间：2022-11-18  修订日期：2023-03-12
DOI：
中文关键词:  梨  cDNA文库  酵母双杂交技术
英文关键词:
基金项目:国家梨产业技术体系(CARS-28)；国家重点研发计划2020YFB1000202；湖北省农业科技创新中心重大研发项目(2020-620-000-002-05)资助。
作者单位E-mail
龚 宏 长江大学园艺园林学院 homegong@163.com 
易善萍 华中农业大学园艺林学学院 ysp2926755238@163.com 
聂显双 长江大学园艺园林学院 niexianshuang@163.com 
刘 政 湖北省农业科学院果树茶叶研究所 liuzhenghzau@aliyun.com 
李谢雨 湖北省农业科学院果树茶叶研究所 lixieyu@qq.com 
杨立 湖北省农业科学院果树茶叶研究所 kelizi@126.com 
程寅胜 湖北省农业科学院果树茶叶研究所 chengyinsheng1991@163.com 
张义* 长江大学园艺园林学院 784685636@qq.com 
伍 涛 湖北省农业科学院果树茶叶研究所 wutaoga556@163.com 
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中文摘要:
      酵母双杂交是检测蛋白质之间相互作用的有效手段。构建梨酵母双杂交cDNA文库，能为利用酵母双杂交技术探究梨基因功能的互作机制提供技术支撑。本研究以沙梨主栽品种‘圆黄’梨的叶片和果肉为材料，采用Trizol法提取其RNA，利用SMART技术经LD-PCR合成全长cDNA，通过同源重组法与pGADT7载体连接，再电转化至大肠杆菌菌株。经检测，构建的cDNA文库滴度为1.76×108 cfu/mL，文库片段插入阳性率为100%，片段长度主要分布在600~1500 bp。该研究结果表明，构建的cDNA文库质量较高，完整性较好，能为后续利用酵母双杂交技术鉴定基因的互作蛋白奠定基础。
英文摘要:
      
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